【求助】关于Stealth™ RNA和siRNA

2023-06-29 08:43| 来源: 网络整理| 查看: 265

请问各位，最近看到Stealth™ RNA的干扰效果比siRNA要好，不知其操作步骤有何区别？做Stealth™ RNA要比siRNA贵多少呢？谢谢！在应用siRNA的实验中，存在着以下三个方面的潜在问题，或者说是挑战：・ siRNA会引起非特异性的细胞压力反应（stress response），导致细胞的死亡或改变许多基因的正常表达水平，致使对RNA干涉结果的分析变的很困难；・ siRNA的正负链的任何可能的非特异的同源性都要尽力避免，否则目标mRNA的翻译就不会被有效抑制；・ dsRNA在细胞培养以及体内实验的稳定时间都比较短。 Stealth RNAi是新一代的RNA干涉分子，解决了以上所提到的问题，同时也保持了RNAi的高效性。Stealth™ RNAi分子是经过专利化学修饰的、钝末端、双链25聚体（25mer），有效地消除了细胞的压力反应，取保只有反义链进入rnai通路，使实验的结果更加清晰；这种修饰也提高了其靶向特异性及其稳定性。

我使用过ambin的体外合成kit，弄过sirna，研究一下这个不算太新的玩意，stealth只是多了一步化学修饰，其他都相同。大概流程是：1、设计sirna2、化学修饰3、转染4、检测

可见同sirna无太大差别。我的ambin kit，2005年7200rmb买的，大概转染了80瓶细胞，20多个24孔板。

上了一下invitrogen的网站，stealth报价invitrogen报价：

Stealth™ RNAi以20 nmole 退火双链提供，提供24孔板大约2000次转染。Stealth修饰的报价为$300/条（终浓度为5OD,不能再进行其它修饰）具体合成多少钱，有没有优惠。你联系一下公司。好像比sirna还便宜。当然可能当时我买贵了。关于设计可以看ambin的sirna指南，把sirna转为stealth是很容易的，二者原理一样，只是多了个修饰。转染看看这个具体的转染方法

有已经用过的来交流一下，很想知道，有没有广告传说中的神奇！！

非常感谢liuqianghare讲的这么详细既然Stealth™ RNA没有用载体，应该干扰时间不长吧，不知能维持多久？它能连接质粒载体做稳转吗？时间不会太长，应该和sirna相似，转染后24－48小时内检测吧。从原理上讲，应该不能使用表达载体，因为他是体外化学修饰的，估计表达载体内无法完成。我就是想干扰这个基因后观察细胞对药物敏感性变化，不知道要观查多久合适，自我感觉是干扰的时间越久越好，所以想做稳定转染，不知有没有文献说过瞬时转染行不行？再次感谢！

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